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污染防治和避免變性是掌上離心機(jī)的分離要點(diǎn)
閱讀：1549 發(fā)布時(shí)間：2021-12-13
掌上離心機(jī)的離心分離方法仍然具有分離范圍廣、容量大等優(yōu)點(diǎn)；可研究天然生物大分子的水動(dòng)力特性；生物大分子的片段分離可在電離介質(zhì)中進(jìn)行；緩沖液限制很?。ㄔ陔娪炯夹g(shù)中，由于電流的熱效應(yīng)，緩沖液的使用受到限制）。此外，離心仍然廣泛應(yīng)用于各種實(shí)驗(yàn)方法的預(yù)處理階段。考慮到各個(gè)研究部門(mén)的設(shè)備分布，在很多情況下離心的使用是相當(dāng)廣泛的。差速離心率區(qū)密度梯度離心和等密度離心作為一種有效的分離純化方法，在生物大分子的研究中也發(fā)揮著重要作用。下面就來(lái)說(shuō)說(shuō)它的分離要點(diǎn)：
1、污染防治：
為避免生物大分子在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中部分損傷而引起的降解或變性，降解的原因有很多，如實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的外力；有些酶被污染等，但最常見(jiàn)的原因是酶的功能。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，由于樣品中混入了??一些脫氫酶，生物大分子發(fā)生了變性??。
2、避免變性
?。?）掌上離心機(jī)離心前將旋轉(zhuǎn)頭預(yù)冷至接近離心溫度（在冰箱中放置過(guò)夜或在培養(yǎng)箱中保溫）。對(duì)于超速離心機(jī)來(lái)說(shuō)，它的制冷系統(tǒng)主要是用來(lái)抵消旋轉(zhuǎn)頭在稀薄空氣中高速運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，旋轉(zhuǎn)頭表面的線速度從次原因速度到超原因速度時(shí)空氣動(dòng)力摩擦產(chǎn)生的熱量。在真空中只有輻射傳熱的條件下，高速運(yùn)轉(zhuǎn)的旋轉(zhuǎn)頭的溫度從常溫（如夏季30～35℃）長(zhǎng)期下降至5℃（如1小時(shí)左右）。一般應(yīng)預(yù)冷至接近離心溫度（±2℃），以保證在離心初期（15分鐘內(nèi)）旋轉(zhuǎn)頭溫度與樣品溫度一致。
（2）使用固定角度或近垂直管旋轉(zhuǎn)頭或垂直管旋轉(zhuǎn)頭進(jìn)行梯度離心時(shí)，必須使用離心機(jī)的慢加速（0～500rpm）和慢減速（500rpm～0）功能，以保證平穩(wěn)梯度方向的轉(zhuǎn)換。
?。?）掌上離心機(jī)在離心開(kāi)始和結(jié)束時(shí)小心拿取離心管，避免振動(dòng)過(guò)大。
（4）卸樣過(guò)程應(yīng)在無(wú)振動(dòng)試驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行，環(huán)境溫度與離心溫度相近。卸樣方法應(yīng)穩(wěn)定，外力小，盡量不要用泵輸送樣品。