人黑色瘤細(xì)胞系；A375價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人黑色瘤細(xì)胞系；A375價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞源于一位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織，由Giard DJ建系。其染色體為超三倍體，帶有62條染色體。其中九條標(biāo)志染色體普遍存在于A375細(xì)胞中，而普通染色體N2, N6和N22在細(xì)胞中只有一條。該細(xì)胞是與中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞中心交換并保藏。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C165
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

固綠5g
接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
CAS9004-54-0葡聚糖 T-200010g
12-131Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種1mL
液相內(nèi)毒素清除劑500 次
JM109(DE3) 菌種1mL
L- 阿拉伯糖10g
DNA 包被溶液100mL
CAS636-00-06- 羥基多巴胺5g
120701-10鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL
吲哚 -3- 1g
聚乙二醇 6000250g
二硫赤蘚醇1g
DNA 探針變性液10mL
CAS113-98-4青 G 鹽1Mu
90610-1卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL1mL
重組蛋白 A/G1mg
LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
葡萄糖氧化酶10Ku
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）20 次
CAS4197-25-5蘇丹 B5g
90403-5蛋白膠中量回收試劑盒5次
α- 乳糖100g小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠卵巢標(biāo)志物CA125ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血吸蟲(schistosoma)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝