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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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更新時(shí)間：2025-05-09 16:55:00瀏覽次數(shù)：1319
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材料準(zhǔn)備：
II型膠原蛋白：溶解于醋酸（如5 mg膠原溶于10 mM醋酸，4℃過(guò)夜溶解）。
佐劑：與wan全弗氏佐劑（CFA）等體積混合，冰浴超聲乳化（2000 Hz），形成乳白色乳化液（現(xiàn)用現(xiàn)配）。
免疫注射：
shou次免疫：皮下注射乳化液至小鼠尾根部遠(yuǎn)端（劑量100 μl/只，含200 μg膠原），注射后觀察局部反應(yīng)。
加強(qiáng)免疫：shou次免疫后第21天，于原注射部位近端再次注射等量乳化液。
模型評(píng)估：
臨床癥狀：shou次免疫后約27天出現(xiàn)爪部發(fā)紅，35天左右出現(xiàn)嚴(yán)重腫脹、關(guān)節(jié)僵硬（評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0-4分，根據(jù)腫脹程度分級(jí)）。
病理檢測(cè)：通過(guò)HE染色觀察滑膜增生、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、軟骨破壞等，或通過(guò)X光、MRI評(píng)估骨質(zhì)侵蝕。
4. 適用品系：
敏感品系包括DBA/1、B10.RIII等，建議使用7-8周齡小鼠。
原理與優(yōu)勢(shì)：
直接注射抗II型膠原單克隆抗體合劑（如A2-10、F10-21等），聯(lián)合低劑量LPS（脂多糖），繞過(guò)自身抗體生成，快速誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（3-5天發(fā)?。?span>。
優(yōu)點(diǎn)：
適用于CIA不敏感品系（如C57BL/6、BALB/c）及基因敲除小鼠。
發(fā)病率接近100%，病理特征與人類RA高度相似。
操作要點(diǎn)：
抗體與LPS劑量：低劑量抗體合劑（如5-克隆抗體）聯(lián)合LPS注射，減少不良反應(yīng)。
評(píng)估：HE染色顯示滑膜增生、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及軟骨破壞（圖2示例）。
品系選擇：
CIA依賴MHC單倍型（如DBA/1），而CAIA適用于更廣品系（包括T/B細(xì)胞缺陷小鼠）。
模型差異：
周期：CIA需35天以上，CAIA僅需數(shù)天至2周。
成本：CAIA試劑（單克隆抗體）成本較高。
倫理與操作規(guī)范：
需遵守動(dòng)物福利，定期監(jiān)測(cè)體重和活動(dòng)能力，避免過(guò)度應(yīng)激。
CIA模型：適合研究自身免疫反應(yīng)，模擬RA慢性病程，但周期長(zhǎng)、品系限制多。
CAIA模型：適用于快速篩選抗炎藥物或基因研究，尤其對(duì)C57BL/6等品系效果xian著
