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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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2018-9-13 閱讀(2357)
1 兩動(dòng)脈阻斷法(occlusion of bilaterial carotis communis artery)
(1)復(fù)制方法 SD大鼠，雌雄不拘，體重為250～300g。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后，仰臥位固定，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚常規(guī)消毒。頸前正中切口，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈(carotis communis artery, OCA)，夾閉雙側(cè)CCA，同時(shí)合并低血壓以減少腦血流量，造成急性腦缺血。由于嚙齒動(dòng)物(沙土鼠除外)腦血液循環(huán)有較人類豐富的側(cè)支循環(huán)，僅結(jié)扎雙側(cè)CCA不足以明顯降低腦血流量(CBF)，因此結(jié)合降壓藥三丨甲噻吩、酚妥拉明或靜脈放血等方法使動(dòng)脈血壓降低至50mmHg(6.7kPa)，使CBF降低至正常的5％～15％。放血方法：由頸靜脈插管至右心房，供放血并連續(xù)記錄EEG。采用抽血的方法放血，失血達(dá)80mmHg(10.7kPa)時(shí)結(jié)扎雙側(cè)頸動(dòng)脈，再繼續(xù)抽血，使血壓降至6.7kPa。
(2)模型特點(diǎn) 此方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，用一次性手術(shù)即可完成，阻斷可逆，可人為控制動(dòng)物呼吸。采用這種方法復(fù)制的模型，能進(jìn)行缺血再灌流損傷的研究，模擬了臨床上休克、心功能不全、腦血管嚴(yán)重狹窄或阻塞合并血液低灌流引起的腦循環(huán)障礙，造成不同程度的腦組織缺血損傷。因而，對(duì)于探討人類缺血性腦損傷的發(fā)病規(guī)律，評(píng)價(jià)抗腦缺血藥物的療效等有價(jià)值。缺點(diǎn)是：①模型不能在清醒動(dòng)物上復(fù)制，無(wú)法研究血管狹窄后行為學(xué)的變化。②常因存在側(cè)支循環(huán)而造成缺血不，部位不宜確定。③腦缺血時(shí)限長(zhǎng)，有時(shí)導(dǎo)致腦缺血后抽搐、癲癎等并發(fā)癥的發(fā)生。且由于低血壓狀態(tài)，可干擾其他器官、組織的供血和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此方法除可用于大鼠外，也可用于兔、貓和猴的性腦缺血。
2 四動(dòng)脈阻斷法(occlusion of four blood vessels)
(1)復(fù)制方法 SD大鼠，雌雄不拘，體重為250～300g。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后，仰臥位固定，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚常規(guī)消毒。頸前正中切口，分離雙側(cè)頸CCA，套線備用。同時(shí)枕部切口(頸部前傾30°，利于手術(shù)部位的暴露)，借助手術(shù)顯微鏡分離暴露頸椎橫突翼并找左右橫突孔(椎動(dòng)脈在入腦前從此孔下通過(guò))，將灼熱的電烙鐵尖頭(直徑：0.5mm)直接插入翼突孔，深度以2～3mm為宜，電凝雙側(cè)椎動(dòng)脈(vertebral artery, VA)造成永丨久性閉塞。插入時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，1～2s即可，避免造成局部產(chǎn)熱過(guò)高而損傷脊髓和腦干。電烙鐵拔出時(shí)宜緩不宜急，以免將椎動(dòng)脈燒斷部位拉破，引起動(dòng)物大量出血導(dǎo)致死亡。也可采用鉆透頸椎小孔的方法，在直視下直接燒灼VA，成功率100％。24h后用乙丨醚淺麻醉大鼠(也可在清醒狀況下手術(shù))，頸部常規(guī)消毒，打開(kāi)頸前正中切口，將套在雙側(cè)頸總動(dòng)脈下的備用線結(jié)扎(也可用微型無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉兩側(cè) CCA)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要可阻斷血流10～60min。松開(kāi)結(jié)扎線(或動(dòng)脈夾)后可實(shí)行再灌注研究。
(2)模型特點(diǎn) 本模型是一個(gè)能夠?qū)е聡?yán)重大腦缺血，具有較強(qiáng)可復(fù)制性的誘發(fā)模型。優(yōu)點(diǎn)是缺血，檢驗(yàn)缺血是否成功的指標(biāo)明確，且可進(jìn)行缺血再灌注研究。缺點(diǎn)是手術(shù)復(fù)雜，成功率低，個(gè)體差異大，術(shù)后存活率為50％～80％。在手術(shù)過(guò)程中翼突孔的區(qū)分是阻斷VA的關(guān)鍵，在翼突孔前上方有一小切口，若肌肉分離不，易將該切口誤認(rèn)為是翼突孔，若在此處燒灼，不但不能阻斷VA，而且易燒傷脊髓，甚至腦干，引起動(dòng)物立即死亡。
3 全腦反復(fù)缺血再灌注(reperfusion after complete cerebral ischemia)
1.兩動(dòng)脈阻斷后再灌注 按兩動(dòng)脈阻斷法暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈后，在雙側(cè)頸總動(dòng)脈下用已穿好的備用線結(jié)扎或微型無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流(10～60min)，之后松開(kāi)結(jié)扎線(或動(dòng)脈夾)實(shí)行再灌注，可進(jìn)行反復(fù)缺血再灌注研究。
2.四動(dòng)脈阻斷后再灌注 按四動(dòng)脈阻斷法實(shí)施四動(dòng)脈阻斷24h后，再次暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈，用微動(dòng)脈夾可逆性?shī)A閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈5min，反復(fù)3次，每次間隔1h，隨后恢復(fù)供血，縫合創(chuàng)口。
