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食品中粗脂肪含量的測(cè)定（索氏抽提法）

1、目的與要求

1.1  學(xué)習(xí)索氏抽提法測(cè)定脂肪的原理與方法。

1.2  掌握索氏抽提法基本操作要點(diǎn)及影響因素。

2、原理

    利用脂肪能溶于有機(jī)溶劑的性質(zhì)，在索氏提取器中將樣品用無水乙mi或石油mi等溶劑反復(fù)萃取，提取樣品中的脂肪后，蒸去溶劑,所得的物質(zhì)即為脂肪或稱粗脂肪。

3、儀器與試劑

3.1  索氏提取器  如圖3-3所示。

3.2  電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。

3.3  干燥器。

3.4  恒溫水浴箱。

3.5  濾紙筒。

3.6  無水乙mi（不含過氧化物）或石油mi（沸程30℃～60℃）

4、測(cè)定步驟

4.1  樣品處理

4.1.1  固體樣品: 準(zhǔn)確稱取均勻樣品2g～5g（至0.01mg），裝入濾紙筒內(nèi)。

4.1.2  液體或半固體: 準(zhǔn)確稱取均勻樣品5g～10g（至0.01mg），置于蒸發(fā)皿中,加入海砂約20g,攪勻后于沸水浴上蒸干,然后在95℃～105℃下干燥。研細(xì)后全部轉(zhuǎn)入濾紙筒內(nèi)，用沾有乙mi的脫脂棉擦凈所用器皿，并將棉花也放入濾紙筒內(nèi)。

4.2  索氏提取器的清洗

 將索氏提取器各部位充分洗滌并用蒸餾水清洗后烘干。脂肪燒瓶在103℃±2℃的烘箱內(nèi)干燥至恒重（前后兩次稱量差不超過2mg）。

4.3  樣品測(cè)定

4.3.1  將濾紙筒放入索氏提取器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的脂肪燒瓶，由抽提器冷凝管上端加入乙mi或石油醚至瓶?jī)?nèi)容積的2/3處，通入冷凝水，將底瓶浸沒在水浴中加熱，用一小團(tuán)脫脂棉輕輕塞入冷凝管上口。

4.3.2  抽提溫度的控制：水浴溫度應(yīng)控制在使提取液在每6min～8min回流一次為宜。

4.3.3  抽提時(shí)間的控制:  抽提時(shí)間視試樣中粗脂肪含量而定，一般樣品提取6h～12h，堅(jiān)果樣品提取約16h。提取結(jié)束時(shí)，用毛玻璃板接取一滴提取液，如無油斑則表明提取完畢。

4.3.4  提取完畢。取下脂肪燒瓶，回收乙mi或石油mi。待燒瓶?jī)?nèi)乙mi僅剩下1～2mL時(shí)，在水浴上趕盡殘留的溶劑，于95℃～105℃下干燥2h后，置于干燥器中冷卻至室溫，稱量。繼續(xù)干燥30min后冷卻稱量，反復(fù)干燥至恒重（前后兩次稱量差不超過±2mg）。

5、結(jié)果計(jì)算

5.1  數(shù)據(jù)記錄表

5.2  計(jì)算公式

X（％）=×100

式中：X—樣品中粗脂肪的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，單位(％)。

      m—-樣品的質(zhì)量, 單位(g)；

      m₀ —脂肪燒瓶的質(zhì)量, 單位(g)；

m₁ —脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量, 單位(g)。

6、注意事項(xiàng)

6.1  抽提劑乙mi是易燃，易爆物質(zhì)，應(yīng)注意通風(fēng)并且不能有火源。

6.2  樣品濾紙筒的高度不能超過虹吸管，否則上部脂肪不能提盡而造成誤差。

6.3  樣品和醚浸出物在烘箱中干燥時(shí)，時(shí)間不能過長(zhǎng)，以防止不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質(zhì)量。

6.4  乙mi若放置時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)產(chǎn)生過氧化物。過氧化物不穩(wěn)定，當(dāng)蒸餾或干燥時(shí)會(huì)發(fā)生爆炸，故使用前應(yīng)嚴(yán)格檢查，并除去過氧化物。

6.4.1  檢查方法：取5mL乙mi于試管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振搖1min。靜置分層。若有過氧化物則放出游離碘，水層是黃色（或加4滴5 g/L淀粉指示劑顯藍(lán)色），則該乙mi需處理后使用。

6.4.2  去除過氧化物的方法：將乙mi倒入蒸餾瓶中加一段無銹鐵絲或鋁絲，收集重蒸餾乙mi。

6.5  反復(fù)加熱可能會(huì)因脂類氧化而增重，質(zhì)量增加時(shí)，以增重前的質(zhì)量為恒重。

7、思考題

7.1  簡(jiǎn)述索氏抽提器的提取原理及應(yīng)用范圍？

7.2  潮濕的樣品可否采用乙mi直接提取？為什么？

7.3  使用乙mi作脂肪提取溶劑時(shí)，應(yīng)注意的事項(xiàng)有哪些？為什么？

參考資料：杭州聚同電子有限公司  http://www.hz-jtone。。ｃｏｍ  

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