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毛細(xì)管離子色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定藍(lán)藻發(fā)酵液中的糖
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上海希言科學(xué)儀器有限公司
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毛細(xì)管離子色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定藍(lán)藻發(fā)酵液中的糖
賽默飛近日發(fā)布藍(lán)藻發(fā)酵液中糖的檢測(cè)方案。藍(lán)藻可以進(jìn)行光合作用，與高等植物葉綠素具有一定程度上的同源性，加上其研究體系簡(jiǎn)單，長(zhǎng)期以來(lái)一直是研究光合作用的模式生物。除此之外，藍(lán)藻還可以進(jìn)行固氮作用，將大氣中的氮?dú)饨?jīng)固氮作用轉(zhuǎn)化為可以利用的氮源，用于提高土壤的肥力。如果可以通過(guò)代謝工程改造藍(lán)細(xì)菌生產(chǎn)蔗糖并提供給大腸桿菌等微生物發(fā)酵生產(chǎn)生物燃料，必將加速整個(gè)生物燃料的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，具有顯著的意義。
賽默飛發(fā)布的藍(lán)藻發(fā)酵液中糖的檢測(cè)方案，采用 Thermo ScientificTMDionexTMICS-4000 毛細(xì)管 HPICTM系統(tǒng)和質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定發(fā)酵液中的一些成分，分離測(cè)定7種糖，如蔗糖、乳糖、葡萄糖、海藻糖、葡萄糖甘油酯、甘露糖、果糖等。毛細(xì)管離子色譜常用色譜柱直徑為0.4 mm，流速為10 μL/min，其進(jìn)樣體積通常為0.4 μL，與常規(guī)分析型離子色譜相比，其靈敏度是常規(guī)離子色譜的近百倍。毛細(xì)管離子色譜的流速是10 μL/min，符合質(zhì)譜對(duì)低流速的需求。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸鈉，以提高糖在質(zhì)譜中的重現(xiàn)性。此方法的建立有利于了解其基因改造效果，對(duì)于充分利用藍(lán)藻意義重大。毛細(xì)管離子色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定糖方法操作簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，線性范圍內(nèi)相關(guān)性好，準(zhǔn)確度高，進(jìn)一步拓展了毛細(xì)管離子色譜的應(yīng)用范圍，具有較高的實(shí)用價(jià)值。