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應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
N-MID-OT ELISA 借雙抗夾心法,精準(zhǔn)測(cè)血清中 N 端中段骨鈣素含量。用于骨質(zhì)疏松等骨病診斷、兒童骨骼發(fā)育評(píng)估,靈敏特異、操作簡(jiǎn)便。
N-MID-OT ELISA
N-MID-OT ELISA是一種專(zhuān)門(mén)用于精準(zhǔn)定量檢測(cè)血清中 N 端中段骨鈣素(N-MID Osteocalcin)含量的技術(shù)。骨鈣素是一種由成骨細(xì)胞合成并分泌的非膠原蛋白,在骨骼的礦化和代謝過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。N 端中段骨鈣素作為骨鈣素的一種穩(wěn)定片段,其在血清中的含量變化能夠準(zhǔn)確反映成骨細(xì)胞的活性以及骨代謝的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),因此該檢測(cè)技術(shù)在骨骼健康相關(guān)研究和臨床診斷中具有重要意義。
工作原理
N-MID-OT ELISA 運(yùn)用經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)原理,采用雙抗體夾心法對(duì) N 端中段骨鈣素進(jìn)行檢測(cè)。試劑盒內(nèi)的微孔板表面,預(yù)先已牢固包被針對(duì)人 N-MID Osteocalcin 的特異性抗體。當(dāng)含有 N-MID Osteocalcin 的血清樣本加入到微孔板的反應(yīng)孔中時(shí),樣本里的 N-MID Osteocalcin 會(huì)迅速與包被抗體發(fā)生特異性結(jié)合,形成抗原 - 抗體復(fù)合物。緊接著,向反應(yīng)體系中添加酶標(biāo)記的另一種針對(duì) N-MID Osteocalcin 不同抗原表位的抗體。這種酶標(biāo)抗體能夠特異性地識(shí)別并結(jié)合已經(jīng)與包被抗體結(jié)合的 N-MID Osteocalcin,進(jìn)而構(gòu)建起穩(wěn)定的 “包被抗體 - N-MID Osteocalcin - 酶標(biāo)抗體" 免疫復(fù)合物結(jié)構(gòu)。完成結(jié)合步驟后,通過(guò)多次嚴(yán)格且細(xì)致的洗滌操作,將未參與特異性結(jié)合的多余試劑、雜質(zhì)以及未結(jié)合的抗體等物質(zhì)徹di清除,以此確保反應(yīng)體系的純凈度和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。最后,加入酶的特異性底物。此時(shí),與免疫復(fù)合物相連的酶會(huì)對(duì)底物進(jìn)行高效催化,引發(fā)底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng),進(jìn)而產(chǎn)生顏色變化。而顏色變化的程度,也就是顏色的深淺,與樣本中 N-MID Osteocalcin 的實(shí)際含量呈正相關(guān)關(guān)系。借助專(zhuān)業(yè)的酶標(biāo)儀精確測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值,并將該值與試劑盒所提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行仔細(xì)比對(duì)分析,就能夠準(zhǔn)確無(wú)誤地計(jì)算出樣本中 N-MID Osteocalcin 的濃度數(shù)值。
應(yīng)用場(chǎng)景
骨質(zhì)疏松癥診斷與病情監(jiān)測(cè):骨質(zhì)疏松癥是一種以骨量減少、骨組織微結(jié)構(gòu)破壞為特征,導(dǎo)致骨脆性增加、易發(fā)生骨折的全身性骨病。在骨質(zhì)疏松癥患者中,骨代謝失衡,成骨細(xì)胞活性改變,血清 N-MID Osteocalcin 水平會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化。通過(guò) N-MID-OT ELISA 檢測(cè)患者血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,有助于早期診斷骨質(zhì)疏松癥。例如,絕經(jīng)后女性由于雌激素水平下降,骨轉(zhuǎn)換加快,血清 N-MID Osteocalcin 水平往往升高,檢測(cè)該指標(biāo)可輔助判斷其患骨質(zhì)疏松癥的風(fēng)險(xiǎn)。并且,在骨質(zhì)疏松癥治療過(guò)程中,持續(xù)監(jiān)測(cè) N-MID Osteocalcin 水平的變化,可有效評(píng)估治療效果。若治療有效,N-MID Osteocalcin 水平會(huì)逐漸趨于正常,提示骨代謝逐漸恢復(fù)平衡。
兒童骨骼發(fā)育評(píng)估:在兒童生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,骨骼的正常生長(zhǎng)和礦化至關(guān)重要。N-MID Osteocalcin 水平與兒童骨骼的生長(zhǎng)速率密切相關(guān)。使用 N-MID-OT ELISA 檢測(cè)兒童血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,能夠評(píng)估其骨骼發(fā)育情況。對(duì)于生長(zhǎng)發(fā)育遲緩或骨骼發(fā)育異常的兒童,檢測(cè)該指標(biāo)有助于分析病因,制定合理的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)或治療方案。例如,在維生素 D 缺乏性佝僂病患兒中,由于鈣磷代謝紊亂,影響骨骼礦化,血清 N-MID Osteocalcin 水平可能出現(xiàn)異常,通過(guò)檢測(cè)可及時(shí)發(fā)現(xiàn)并指導(dǎo)治療。
代謝性骨病研究:在一些代謝性骨病,如甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、腎性骨病等疾病中,骨代謝受到不同程度的影響,N-MID Osteocalcin 含量也會(huì)發(fā)生改變。通過(guò) N-MID-OT ELISA 檢測(cè)患者血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,可輔助診斷代謝性骨病,了解疾病的進(jìn)展情況,并為治療方案的制定提供依據(jù)。例如,在甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥患者中,甲狀旁腺激素分泌過(guò)多,導(dǎo)致骨吸收增加,血清 N-MID Osteocalcin 水平可能升高,檢測(cè)該指標(biāo)有助于判斷病情嚴(yán)重程度和評(píng)估治療效果。