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中級會(huì)員 | 第12年

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戴安色譜柱的注意事項(xiàng)

時(shí)間:2017-7-25閱讀:743
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    戴安色譜柱是一種內(nèi)有固定相,用以分離混合物的柱管。裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。戴安色譜柱多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。

戴安色譜柱注意事項(xiàng):

1.逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,戴安色譜柱不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/font>

2.選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。戴安色譜柱有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

3.免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。

4.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml

5.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)戴安色譜柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

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