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植物類黃酮含量檢測試劑盒

產(chǎn)品內(nèi)容：提取液：60%乙醇，自備。試劑一：液體3mL×1瓶，4℃保存。試劑二：液體3mL×1瓶，4℃保存。試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內(nèi)羥自由基，預防癌癥等作用。在堿性亞硝酸鹽溶液中，類黃酮與鋁離子形成在502nm處有特征吸收峰的紅色絡合物，測定樣品提取液在502nm處的吸光值，即可計算樣品類黃酮含量。

自備實驗用品及儀器天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。

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操作步驟：

一、類黃酮提取將樣本烘干恒重，粉碎，過 40 目篩之后，稱取約 0.1g，加入 2.5mL 提取液，用超聲提取法進行提取，超聲功率 300W，破碎 5s，間歇 8s，60℃，提取 30min。10000g，25℃，離心 10min，取上清，用提取液定容 2.5mL，待測。

二、測定操作表對照管 測定管樣本待測液（μL） 200 200 試劑一（μL） 50 50 混勻，25℃靜置5min 試劑二（μL） 50 混勻，25℃靜置5min 試劑三（μL） 400 400 60%乙醇（μL） 350 350 混勻，25℃靜置15 min，對照管調(diào)零，1mL玻璃比色皿，測定A502。

三、 類黃酮含量計算公式

標準曲線：y = 6.2096x+0.0008，R2 = 0.9996 類黃酮含量（mg/g）=（A502-0.0008）÷6.2096×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 2.013×A502÷W V樣總：加入提取液體積，2.5mL； V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應中樣品體積，0.2mL； W：樣品質(zhì)量，g

注意事項： 1、 吸光值大于0.8，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。 2、 顯色完成后立即測定，2小時后吸光值會下降。 3、 檢出限為12.8μg/g。

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