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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A試劑盒說(shuō)明書
閱讀：1186 發(fā)布時(shí)間：2015-5-19| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 42.3KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1186次 |
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主要用途
植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶活性直接光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在運(yùn)用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物，在還原酶的催化下，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法來(lái)測(cè)定植物裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解懸液、微粒體，或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性檢測(cè)，以及抑制劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
甲戊二羥酸通路（mevalonate pathway），又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路，是所有高等真核生物和許多細(xì)菌具有的重要的細(xì)胞代謝通路，用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和異戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作為生物大分子合成的基礎(chǔ)，包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細(xì)胞膜維護(hù)、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶，調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上，含有8個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，其中活性結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標(biāo)，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物組織中，HMG-COA還原酶位于質(zhì)體、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，含有2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，組織發(fā)育、光照、病原菌感染、創(chuàng)傷等將誘導(dǎo)HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下，將4個(gè)電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原為甲戊二羥酸（mevalonate），同時(shí)產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH）被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值變化（340nm 波長(zhǎng)），來(lái)定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶反應(yīng)系統(tǒng)為：