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冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
閱讀：1213 發(fā)布時(shí)間：2015-5-13| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 28.5KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1213次 |
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主要用途
冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑是一種旨在使用偶聯(lián)偶氮技術(shù)，在底物存在的情況下，分析組織樣本中堿性磷酸酶表達(dá)，而呈現(xiàn)亮紅色沉淀現(xiàn)象的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于動(dòng)物組織冰凍切片，同時(shí)也適合原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的酶活性檢測(cè)。尤其可用于骨組織病理生理的研究和干細(xì)胞分化能力的鑒定。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，靈敏牢固，顯色清晰。
技術(shù)背景
堿性磷酸酶（ALKALINE PHOSPHATASE）在堿性環(huán)境下催化各種醇和酚的磷酸酯水解，存在于活躍運(yùn)輸?shù)哪ど希缑?xì)血管及毛細(xì)血管的動(dòng)脈部分的內(nèi)皮，腎近曲小管壁邊緣和小腸上皮的紋狀緣，胎盤組織，未分化的干細(xì)胞等表達(dá)含量為豐富。它與骨質(zhì)的形成，維持細(xì)胞內(nèi)磷酸酶的濃度，以及與經(jīng)膜吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)過程有關(guān)。偶聯(lián)偶氮技術(shù)的基本原理為堿性磷酸酶水解底物（磷酸萘酯）釋放出萘酚，立即為重氮鹽所捕獲而成為不溶性有色的偶氮染料。實(shí)驗(yàn)初（1944）應(yīng)用β-萘磷酸鹽作為底物，釋放出的萘酚與重氮α-萘胺偶聯(lián)，在酶的活動(dòng)處形成有色沉淀。Burstone （1962）推薦使用替代萘酚，如萘酚AS-MX磷酸鹽。重氮鹽有很多種，但較適宜的有Fast blue RR，F(xiàn)ast red TR，F(xiàn)ast violet B，F(xiàn)ast blue VRT 和Fast black B。偶聯(lián)偶氮技術(shù)孵育時(shí)間短；穩(wěn)定，靈敏；在正常組織中因無萘酚，故不需要對(duì)照；反應(yīng)產(chǎn)物為偶氮染料難以溶解，不易彌散因而圖象清晰。