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組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法

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主要用途


 組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過CpG甲基轉(zhuǎn)移酶、腺苷同型半胱氨酸核苷酶、腺嘌呤脫氨酶和黃嘌呤氧化酶應(yīng)系統(tǒng)中生成過氧化氫,使用顯色染料和過氧化酶后,產(chǎn)生醌亞胺產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測(cè)定組織裂解樣品中S-腺苷甲硫氨酸含量而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)S-腺苷甲硫氨酸的定量檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosylmethionine;SAM或AdoMet)是參與甲基轉(zhuǎn)移的輔酶和多胺合成的前體(precursor),通過甲硫氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶(methionine adenosyltransferase)催化腺苷三磷酸(adenosine triphosphate;ATP)和甲硫氨酸(methionine)結(jié)合而成,其分子量399.447,分子式為C15H23N6O5S。作為供體,參與轉(zhuǎn)甲基(transmethylation)、轉(zhuǎn)硫(transsulfuration和轉(zhuǎn)氨丙基transamino propylation代謝以及多胺合成大約40多個(gè)反應(yīng)轉(zhuǎn)甲基反應(yīng),由S-腺苷甲硫氨酸提供甲基基團(tuán)到核酸、蛋白和脂類分子上。主要反應(yīng)場(chǎng)所在肝臟。S-腺苷甲硫氨酸異常增高,與腫瘤發(fā)生有關(guān),而S-腺苷甲硫氨酸異常降低,與抑郁癥、癡呆dementia)、空泡性脊髓病vacuolar myelopathy)、維生素B12缺乏癥(vitamin B12 deficiency)等發(fā)生有關(guān)。此外,機(jī)體內(nèi)的SAM含量顯著高于SAH。SAM/SAH比例降低,則引起DNA甲基化不足,染色體構(gòu)像改變,抑制細(xì)胞甲基轉(zhuǎn)移酶活力,干擾同型半胱氨酸和腺嘌呤的清除,進(jìn)一步導(dǎo)致基因表達(dá)和信號(hào)傳導(dǎo)異常,以及免疫缺陷等。基于S-腺苷甲硫氨酸通過CpG甲基轉(zhuǎn)移酶(M.SssI;42KD把甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到人工合成甲基受體底物分子poly[dI-C) dI-C)],而生成S腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine;AdoHcy),進(jìn)而快速被腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcy nucleosidase)分解為S-核糖同型半胱氨酸(S-ribosylhomo cysteine)和腺嘌呤(adenine),腺嘌呤腺嘌呤脫氨酶Adenine deaminase)產(chǎn)生次黃嘌呤,通過黃嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)催化,生成過氧化氫,然后借助過氧化酶(peroxidase)的作用,與對(duì)羥基苯甲酸p-hydroxybenzoic acid)和氨基安替比林4-aminoantipyrine)反應(yīng),形成有色醌亞胺quinoneimine,通過其吸收峰值的變化510nm波長(zhǎng)),來定量分析S-腺苷甲硫氨酸的含量。反應(yīng)系統(tǒng)為:

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