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技術(shù)文章

小牛血清使用注意事項(xiàng)及細(xì)胞毒性評(píng)估方法

閱讀:637          發(fā)布時(shí)間:2024-10-23

小牛血清在生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)中至關(guān)重要,但其使用需嚴(yán)格遵守以下注意事項(xiàng):

  1. 供血來源:供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔,并在產(chǎn)后24小時(shí)內(nèi)抽血,期間不得吸取母乳。

  2. 無菌操作:以無菌操作自頸動(dòng)脈放血,并在無菌條件下分離血清及濾菌,全過程需在36小時(shí)內(nèi)完成。

  3. 保存條件:濾菌后的血清需妥善保存,確保其質(zhì)量和穩(wěn)定性。

  4. 質(zhì)量檢測(cè):使用前需進(jìn)行細(xì)菌、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測(cè)定,確認(rèn)無污染后方可使用。

  5. 總蛋白含量測(cè)定:每批小牛血清應(yīng)測(cè)定總蛋白含量,并分別配成不同濃度進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),觀察其細(xì)胞毒性。

語燕生物相關(guān)信息

語燕生物作為專業(yè)供應(yīng)商,致力于提供高品質(zhì)的小牛血清產(chǎn)品。其產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保滿足生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)的需求。

細(xì)胞毒性評(píng)估方法

觀察小牛血清的細(xì)胞毒性可采用多種方法,包括:

  1. MTS比色法:基于活細(xì)胞還原MTS產(chǎn)生甲瓚產(chǎn)物的原理,通過測(cè)定甲瓚產(chǎn)物的吸光度來評(píng)估細(xì)胞存活率和增殖情況。

  2. 細(xì)胞生長曲線測(cè)定:通過繪制細(xì)胞在不同濃度小牛血清中的生長曲線,觀察小牛血清對(duì)細(xì)胞增殖的影響。

  3. 細(xì)胞形態(tài)觀察:利用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),直觀了解細(xì)胞在含有小牛血清的培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)。

  4. 克隆形成率測(cè)定:通過測(cè)定克隆形成率來評(píng)估小牛血清對(duì)細(xì)胞增殖和存活的影響。

  5. 乳酸脫氫酶(LDH)釋放試驗(yàn):通過測(cè)定培養(yǎng)液中LDH的含量來反映細(xì)胞膜的完整性和細(xì)胞的損傷程度。

綜上所述,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和條件,可以選擇合適的方法進(jìn)行小牛血清的細(xì)胞毒性評(píng)估。


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