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口服透明質(zhì)酸對小鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用

陳 潔1，增田泰伸2，臼田美香2，木村守2，

徐文斌1，鄭潮鵬1，洪怡藍(lán)1，任曉靜1，奚印慈1,*

(1.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；

2.日本丘比株式會社，日本 東京 1500002)

摘 要：目的：探討口服透明質(zhì)酸(HA)對小鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)的治療作用。方法：將40只6周齡的雄性小鼠隨機分成4個小組，正常組、模型組、HA組和雙氯芬酸鈉組。通過給模型組、HA組和雙氯芬酸鈉組小鼠右后足注射弗氏*佐劑(FCA)建立佐劑性關(guān)節(jié)炎模型，經(jīng)連續(xù)4周口服透明質(zhì)酸進(jìn)行治療后，分別對小鼠的體質(zhì)量、足跖厚度進(jìn)行測量，觀察小鼠膝關(guān)節(jié)腫脹程度并評分，同時采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測小鼠血清中白介素-1(IL-1)和HA的含量。結(jié)果：口服HA能顯著降低小鼠足跖厚度和關(guān)節(jié)炎指數(shù)，同時血清中IL-1和HA含量亦顯著降低；并且各項指標(biāo)與雙氯芬酸鈉無顯著性差異。結(jié)論：口服透明質(zhì)酸能有效地緩解小鼠膝關(guān)節(jié)的腫脹，降低血清中IL-1的含量，增強活動能力，因而對小鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎具有良好的治療作用。

關(guān)鍵詞：口服透明質(zhì)酸；動物模型；佐劑性關(guān)節(jié)炎隨著國民老齡化的急速加劇，由此導(dǎo)致的老年人疾病發(fā)生率逐年上升。其中，關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生率更是與日俱增，2010年我國60歲以上老人中有約55%的人患有該疾病。我國現(xiàn)有關(guān)節(jié)炎患者1.2億人以上，且數(shù)量還在不斷增加[1]。目前有效治療關(guān)節(jié)炎的主要方法包括藥物治療和手術(shù)治療。藥物治療方面：主要有鎮(zhèn)痛劑、非甾體類藥物和糖皮質(zhì)激素。然而，鎮(zhèn)痛劑只能在短期內(nèi)暫時緩解患者疼痛，無法抑制或延緩病情的發(fā)展[2]；非甾體類藥物和糖皮質(zhì)激素雖然對關(guān)節(jié)炎具有治療作用，但是副作用嚴(yán)重，使病人難以堅持長期服用[3]。手術(shù)治療上[4]，如關(guān)節(jié)清理、截骨術(shù)及人工關(guān)節(jié)置換手術(shù)，創(chuàng)傷大，易感染，術(shù)后并發(fā)癥較多，而且關(guān)節(jié)置換術(shù)價格昂貴，并非所有患者都有經(jīng)濟承受能力。透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)作為一種天然活性物質(zhì)，以自由鏈形式存在于關(guān)節(jié)內(nèi)，是唯yi不含硫酸基團的氨基聚糖，主要由軟骨細(xì)胞和滑膜B細(xì)胞分泌，是關(guān)節(jié)滑液和軟骨基質(zhì)的重要成分。但人體關(guān)節(jié)內(nèi)HA的含量會隨著年齡的增長而流失，因而通過適當(dāng)?shù)耐緩窖a充一定量的HA成為了治療關(guān)節(jié)炎的良好方法。20世紀(jì)60年代，Balazs等[5]首先提出了黏彈性補充提案療法的概念。隨著研究的不斷深入，1974年P(guān)eyron等[6]*將HA以針劑的形式注射進(jìn)患者體內(nèi)對骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)行治療，并取得良好的療效。近年來國內(nèi)外大量臨床研究也顯示[7-9]，關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射HA對治療關(guān)節(jié)炎有顯著效果，且既無嚴(yán)重副作用又安全可靠。但關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射技巧*，且患者需忍受比較劇烈的痛楚。目前，國家衛(wèi)生部已認(rèn)定HA為新資源食品的一種。本研究以從HA為研究素材，通過建立佐劑性小鼠關(guān)節(jié)炎模型，研究口服HA對佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis，AA)的治療作用，旨在開發(fā)、確立一種無需忍受痛楚就可緩解變形性膝關(guān)節(jié)炎的新方法。

1 材材料與方法 料與方法

1.1 材料、試劑與儀器雄性ICR小鼠(體質(zhì)量約30g，年齡為6周齡) 上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。弗氏*佐劑(fluoride’s complete adjuvant，F(xiàn)CA) 美國Sigma公司；透明質(zhì)酸(相對分子質(zhì)量約為1×106，純度≥95%) 日本丘比株式會社；雙氯芬酸鈉 廣西神通藥業(yè)有限公司；氯化鈉 國藥集團化學(xué)試劑有限公司；小鼠IL-1 ELISA試劑盒 上海恒遠(yuǎn)生物公司；小鼠HA ELISA試劑盒 和光純藥工業(yè)株式會社。YP5002電子天平 上海佑科有限公司；CT14RD高臺式高速冷凍離心機 上海天美儀器有限公司；550型酶標(biāo)儀 美國Bio-Rad公司；游標(biāo)卡尺 杭州瑞騰精測食品有限公司。

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