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液相色譜日常維護(hù)---流動相知識

流動相有機(jī)溶劑選擇

 a.采用“HPLC"級溶劑

b.避免使用會引起柱效損失或保留特性變化的溶劑

c.對試樣有適宜的溶解度

d.化學(xué)穩(wěn)定性要好

e.溶劑粘度要低

液相分析常用水

a.純化水（娃哈哈純凈水，屈臣氏蒸餾水）

b.蒸餾水

c.去離子水

水的獲取途徑

a.專門的純水機(jī)或超純水機(jī)：理想的HPLC水應(yīng)為18.2MΩ的超純水，并通過0.22um的濾膜，除去熱源，有機(jī)物，無機(jī)離子等

b.去離子水重蒸

c.市場購買娃哈哈純凈水，屈臣氏蒸餾水

選擇HPLC級有機(jī)溶劑原因

a.經(jīng)過了蒸餾和0.45u的過濾（除纖維毛，未溶解的機(jī)械顆粒）

b.不含防腐劑和抗氧化劑

c.除去了有紫外吸收的雜質(zhì) 常用溶劑及紫外截止波長

緩沖溶液的使用

a.使用前必須過濾

b.使用前必須先用相同比例（甲醇比例相同）的甲醇水溶液沖洗柱子，防止緩沖鹽的析出

c.使用后一定要進(jìn)行清洗，以免造成腐蝕、磨損、阻塞：用高比例水相的甲醇水溶液沖洗40min（1mL/min），再用甲醇沖洗30min

d.用純水沖洗泵頭清洗管路

e.易受到細(xì)菌和霉菌的影響，最好現(xiàn)配現(xiàn)用

過濾

a.過濾掉流動相中固體顆粒和微生物，防止堵塞儀器和色譜柱

b.使用≤0.45um的過濾膜：水/水溶液---水系膜，有機(jī)溶劑---有機(jī)膜

溶劑過濾頭堵塞

現(xiàn)象：管路中不斷有氣泡生成

措施：采用異丙醇（或5%稀硝酸）超聲波清洗，再用蒸餾水清洗

脫氣

除去流動相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡

氣泡對測定的影響： 泵中氣泡使液流波動，改變保留時間和峰面積

柱中氣泡使流動相繞流，峰變形

檢測器中的氣泡產(chǎn)生基線波動

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