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是誰的PCR實驗又失敗了？

閱讀：270 發(fā)布時間：2023-10-13

時間：周五下午

坐標：實驗室

認真點完96孔板的你，貼上封板膜，放入PCR儀，跑完4小時的程序后準備美美下班?？戳艘谎蹟?shù)據(jù)，再看一眼PCR板——

你（瞳孔地震）：“師兄！跑完P(guān)CR，邊緣孔的液體體積怎么看起來少了？”

你師兄（仔細觀察）：“把‘看起來’去掉。”

原來是因為

實驗室前輩們總結(jié)出了影響PCR的n大要素，反應步驟、引物設計……PCR板的選擇往往是最容易被忽視的，但同樣至關(guān)重要。

1. 污染源

從核酸提取開始到后續(xù)目的片段定向擴增，都要在無DNase與RNase、無PCR抑制劑的環(huán)境中進行，否則這些污染物會大大降低擴增效率。這是PCR耗材的基本要求，質(zhì)量的關(guān)鍵取決于生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度和工藝質(zhì)控。

2. 硬度

硬質(zhì)框架PCR板比普通PCR板有更高的硬度，不會出現(xiàn)“翹邊”的現(xiàn)象，在貼膜的時候方便對每個孔“雨露均沾”，達到良好的密封性。

3. 蒸發(fā)率

PCR實驗在小體系（微升級別）中反應，且程序包含溫度的循環(huán)升降，這些都容易造成體系蒸發(fā)的邊緣效應，影響產(chǎn)物濃度。因此PCR板需搭配高質(zhì)量的封板膜，降低體系蒸發(fā)率，確保最終數(shù)據(jù)的可靠性。

4小時PCR后的剩余體積 (初始體積-20ul)

4. 熒光轉(zhuǎn)化率

PCR孔壁經(jīng)特殊設計的二氧化鈦著色工藝，能優(yōu)化熒光定量PCR (qRCR) 反應的熒光信號反射效率，減少孔間信號交叉污染。相較于透明的PCR耗材，白色PCR板和PCR管的孔壁能更靈敏地反射熒光信號，優(yōu)化實驗結(jié)果。

特殊著色工藝的白色PCR耗材優(yōu)化熒光信號結(jié)果

BRAND 硬質(zhì)框架PCR板，現(xiàn)在購買有促銷噢！

不含DNA、DNase、RNase、PCR抑制劑，在超過3000平方米的潔凈受控車間生產(chǎn)，環(huán)境滿足ISO 14 644-1的5級、7級和8級標準。
機械強度好，不翹邊，易貼膜。
搭配封板膜使用，減少蒸發(fā)邊緣效應。
白色PCR產(chǎn)品優(yōu)化熒光反射，減少孔間信號交叉污染。