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維護高純硅膠色譜柱時需要注意這些問題

閱讀：253 發(fā)布時間：2023-2-14

　　色譜法是實驗室非常重要和常用的分析方法，由于色譜法可以連續(xù)濃縮、分離、純化和測定樣品，它已成為每個分析人員常用的分析和測試方法，并已廣泛應(yīng)用于各個行業(yè)?？梢哉f，只要有分析任務(wù)，就用色譜分析。

　　在色譜操作過程中，為了維護高純硅膠色譜柱，需要注意以下幾個問題。

　　1、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動。溫度的突然變化或從高處墜落都會影響柱內(nèi)的填充情況；柱壓的突然升高或降低也會對柱內(nèi)的填料產(chǎn)生沖擊，因此應(yīng)緩慢調(diào)節(jié)流速，進樣時閥門轉(zhuǎn)動不宜過慢。

　　2、溶劑的組成應(yīng)逐漸改變，尤其是反相色譜。不應(yīng)直接由有機溶劑改為全水，反之亦然。

　　3、一般來說，不能反沖。只有在生產(chǎn)廠家表明可以反沖的情況下，才能通過反沖去除殘留在柱頭的雜質(zhì)。否則，反沖會迅速降低柱效。

　　4、選擇使用合適的流動相（尤其是pH），避免破壞固定相。有時可以在進樣器前面連接一個預(yù)柱。分析柱為鍵合硅膠時，前置柱為硅膠，可以使流動相在進入分析柱前被硅膠“飽和”，避免硅膠基質(zhì)在分析柱中溶解。

　　5、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品，尤其是生物樣品直接注入。需要對樣品進行預(yù)處理或在進樣器和色譜柱之間連接保護柱。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

　　6、經(jīng)常用強溶劑清洗，以除去柱內(nèi)殘留的雜質(zhì)。清洗時，對流路徑系統(tǒng)中流動相的更換應(yīng)逐漸用可混溶的溶劑轉(zhuǎn)移，每個流動相的體積應(yīng)為柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。