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在腫瘤治療領(lǐng)域，化療作為一種傳統(tǒng)和重要的治療手段，主要是通過化學(xué)藥物殺滅腫瘤細(xì)胞達(dá)到治療的目的。然而，由于其非特異性的殺傷作用引起的不良反應(yīng)一直是患者和醫(yī)療人員的難題。隨著基因靶點(diǎn)研究的不斷深入，腫瘤治療的靶向藥物應(yīng)運(yùn)而生，目標(biāo)明確的治療方式給患者帶來更好治療效果的同時(shí)也表現(xiàn)出更輕的藥物副反應(yīng)，因此在臨床上獲得更廣泛的應(yīng)用場(chǎng)景。替尼類藥物就是典型的靶向藥物代表之一，在非小細(xì)胞肺癌、淋巴癌、其他各種實(shí)體瘤的治療中作用顯著，臨床上對(duì)替尼類藥物血漿分析也對(duì)個(gè)性化用藥及精準(zhǔn)治療具有重要參考意義。

化合物信息

實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)血漿基質(zhì)來說，部分初代替尼化合物如伊馬替尼，可以通過蛋白沉淀的方法直接進(jìn)行分析。但對(duì)于三代替尼類藥物蛋白沉淀方法的回收率較低，很可能無法滿足分析需求，因此我們開發(fā)了基于 SPE 的前處理方法進(jìn)行分析，具體方案如下。

前處理

預(yù)處理：

200 µL 血漿加入 200 µL 5% 甲酸水溶液，渦旋，待凈化；

活化：

96 孔板依次使用 200 µL 甲醇、200 µL 水活化；

上樣：

加載預(yù)處理后的血漿至活化后微孔板；

淋洗：

650 µL 水溶液淋洗微孔板；

洗脫：

用 100 µL 2% 氨水甲醇溶液洗脫 2 次，渦旋混合；

氮干復(fù)溶：

40 ℃ 氮?dú)飧稍锖?，加?200 µL 初始比例流動(dòng)相渦旋混合，待檢測(cè)。

分析

色譜條件

色譜柱：Kinetex C18 (2.1×50 mm, 1.7 μm, 100 ?); P/N: 00B-4475-AN

流動(dòng)相 A 相：5mM 甲酸銨 - 0.1% 甲酸水溶液

流動(dòng)相 B 相：0.1% 甲酸甲醇溶液

流速：0.5 mL/min

柱溫：40 ℃

進(jìn)樣量：5 μL

梯度程序見下表：

質(zhì)譜條件

離子源類型：電噴霧離子源（ESI+）

掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)正負(fù)離子模式（MRM）

噴霧針電壓：5500 V

離子源溫度：500 ℃

加熱器（GS1）：60 psi

輔助加熱氣（GS2）：60 psi

氣簾氣（CUR）：40 psi

碰撞氣（CAD）：10 psi

結(jié)果（藥物譜圖未能有效呈現(xiàn)）

加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

產(chǎn)品