產(chǎn)品名稱：小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

我司提供的ELISA試劑盒經(jīng)濟(jì),實(shí)惠,可靠,完善,穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是您可靠的合作伙伴，凡購(gòu)買我司的試劑盒產(chǎn)品都可提供全程免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)。     產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
本公司ELISA試劑盒均為進(jìn)口抗體對(duì)國(guó)內(nèi)包被，100%保證產(chǎn)品質(zhì)量與客戶實(shí)驗(yàn)結(jié)果，出現(xiàn)任何質(zhì)量問(wèn)題或是客戶出不了實(shí)驗(yàn)結(jié)果均可免費(fèi)退換的！
規(guī)格：96T
庫(kù)存：現(xiàn)貨。
保質(zhì)期：6個(gè)月。
用途：生產(chǎn)、科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究。
運(yùn)輸：快遞（根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式）。
保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。

規(guī)格：96T/48T

檢測(cè)范圍：0.937-60ng/mL

檢測(cè)限：0.41ng/mL

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)＜10%

板間變異系數(shù)＜15%

小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作流程：
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測(cè)定
1.有質(zhì)量問(wèn)題免費(fèi)包換，合同上注明了的（質(zhì)量問(wèn)題包括運(yùn)輸不當(dāng)，客戶在使用過(guò)程中測(cè)不出結(jié)果，等等！）
2.全程技術(shù)指導(dǎo).（包括售前的標(biāo)本收集，使用過(guò)程中不明白的地方，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問(wèn)，我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電）
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。（你只需把標(biāo)本寄過(guò)來(lái)，我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時(shí)間是5天左右）
4.客戶有任何問(wèn)題，我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù)！
為什么實(shí)驗(yàn)過(guò)程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應(yīng)更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。
孵育過(guò)程振蕩，可以加快、加強(qiáng)抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應(yīng)過(guò)程更加*，OD值通常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高；洗滌過(guò)程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時(shí)可以提高試劑盒檢測(cè)的靈敏度，具體操作請(qǐng)參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。

注意事項(xiàng)：
1．酶標(biāo)板袋拆封后，盡快將不用的板孔放回，并放入干燥劑，保持酶標(biāo)板干燥。
2．用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將試劑盒平衡至室溫，各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
3，TMB A液避光保存。
4，洗板過(guò)程非常重要，不充分的洗板易導(dǎo)致假陽(yáng)性。
5．建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。
6．請(qǐng)保持試驗(yàn)過(guò)程的連續(xù)性，禁止酶標(biāo)板干燥，因干燥會(huì)使酶標(biāo)板上的生物成分迅速失活。
7．為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
8．禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
試驗(yàn)所需自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
2.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
3.自動(dòng)洗板機(jī)
4.高精度移液器， EP管及一次性吸頭： 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 5.吸水紙
洗板方法： 手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的PBt或TBT洗滌緩沖液 至少 0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
樣品收集:
1.血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。
2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA或肝素，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂樣品。
3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)
6.樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7.樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融。
結(jié)果判斷:
1. 以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 如有設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計(jì)算。 以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。 1478. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè)，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

9.為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法？

小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，高的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測(cè)定多用此法。