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2025年5月7日14:00，化工儀器網(wǎng)特舉辦“高品質(zhì)[詳細(xì)]
國(guó)內(nèi)首個(gè)臨床質(zhì)譜前處理專家共識(shí)發(fā)布！
2024年01月22日 13:19:52
來源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：8978
2023年12月，由中國(guó)醫(yī)療保健國(guó)際交流促進(jìn)會(huì)基層檢驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化分會(huì)、中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)專業(yè)委員會(huì)組織起草的《液相色譜‐串聯(lián)質(zhì)譜法臨床樣品前處理專家共識(shí)》正式發(fā)布。
【化工儀器網(wǎng) 標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布】2023年12月，由中國(guó)醫(yī)療保健國(guó)際交流促進(jìn)會(huì)基層檢驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化分會(huì)、中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)專業(yè)委員會(huì)組織起草的《液相色譜‐串聯(lián)質(zhì)譜法臨床樣品前處理專家共識(shí)》正式發(fā)布，旨在為實(shí)驗(yàn)室方法建立提供指導(dǎo)，助力臨床質(zhì)譜檢測(cè)方法的研發(fā)規(guī)范發(fā)展，這也是國(guó)內(nèi)首個(gè)臨床質(zhì)譜前處理專家共識(shí)。
液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法(LC - MS/MS)集色譜技術(shù)的高分離能力和質(zhì)譜技術(shù)的高選擇性、高特異性及高靈敏性的優(yōu)點(diǎn)于一體，成為臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域最具有生命力的新技術(shù)之一，但其分析效果往往受待測(cè)樣品特性制約。由于質(zhì)譜儀的抗干擾能力有限,生物樣本多需要進(jìn)行合適的樣品前處理才能有效提高檢測(cè)性能，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)。前處理的主要作用是將目標(biāo)分析物從生物基質(zhì)中有選擇性地分離出來，減少其他基質(zhì)組分的干擾。同時(shí)，還可將目標(biāo)分析物濃縮和富集，提高檢測(cè)靈敏度。目前，臨床樣本前處理方法不僅種類多，個(gè)別方法耗時(shí)繁瑣，給實(shí)驗(yàn)室人員在方法選擇和開發(fā)及標(biāo)準(zhǔn)化操作等方面帶來了困難。因此，本共識(shí)旨在為實(shí)驗(yàn)室方法建立提供指導(dǎo)，助力臨床質(zhì)譜檢測(cè)方法的研發(fā)規(guī)范發(fā)展。
建議1：樣品前處理技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過色譜質(zhì)譜原理、分析化學(xué)和藥物分析專業(yè)知識(shí)、儀器使用及維護(hù)、檢測(cè)項(xiàng)目、標(biāo)準(zhǔn)操作程序(Standard Operating Procedure，SOP)等專項(xiàng)培訓(xùn)，考核合格方可上崗。
建議2：樣品前處理方法選擇與儀器的靈敏度相關(guān)。濃度低或者質(zhì)譜離子化效率低的化合物，建議采用衍生化的方法提高化合物的離子化效率，或采用靈敏度更高的質(zhì)譜儀器。
建議3：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)待測(cè)物的理化性質(zhì)、生理水平、檢測(cè)精密度、靈敏度等要求，選擇合適的前處理方式和檢測(cè)儀器，實(shí)現(xiàn)可接受的性能要求和臨床預(yù)期用途。
建議4：鑒于液質(zhì)系統(tǒng)對(duì)于所使用的常見試劑、流動(dòng)相化學(xué)級(jí)別和樣本的凈化程度要求較高，建議實(shí)驗(yàn)室使用HPLC或LC‐MS純度的試劑，并采用凈化程度較高的前處理方法，減少對(duì)液質(zhì)系統(tǒng)的損耗或污染。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢測(cè)通量的要求，選擇經(jīng)濟(jì)高效的前處理設(shè)備(管式或板式)。
建議5：待測(cè)物濃度高且基質(zhì)成分簡(jiǎn)單的體液樣本(尿液、淚液、腦脊液等)推薦采用稀釋法。
建議6：對(duì)于含有豐富可溶性蛋白的血清、血漿和全血樣本，測(cè)定小分子化合物時(shí)推薦采用蛋白沉淀法。推薦采用酸、金屬鹽、有機(jī)溶劑等作為沉淀劑與樣本按一定比例混合，渦旋混勻，離心取上清后上機(jī)檢測(cè)。
建議7：根據(jù)待測(cè)物的不同理化性質(zhì)和極性特征，實(shí)驗(yàn)室可以采用適當(dāng)?shù)妮腿》绞綄?duì)待測(cè)物和基質(zhì)其它成分進(jìn)行分離，并綜合干擾物分離難度選擇合適的萃取載體，如從常規(guī)萃取(干血斑)、液液萃取、固液萃取到固相萃取，樣本的凈化能力遞增。
建議8：對(duì)于有磁珠法試劑盒的檢測(cè)項(xiàng)目而言，建議在經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室性能驗(yàn)證合格后采用。搭配全自動(dòng)樣本前處理系統(tǒng)，將極大地提高樣本前處理的自動(dòng)化水平。
建議9：在使用超濾法時(shí)，應(yīng)注意超濾的速率。超濾膜的孔徑應(yīng)該低于結(jié)合目標(biāo)化合物的蛋白質(zhì)的分子量，孔徑過大則雜質(zhì)過高，不能充分分離，孔徑過小則有效成分通透率較低，損失較大。超濾過程中，另外，應(yīng)控制超濾的條件和時(shí)間，如生理?xiàng)l件(37℃、pH7.4)和低至中等的離心力。
建議10：PH值和溫度對(duì)于結(jié)合態(tài)激素和游離激素的平衡至關(guān)重要，應(yīng)在合適的pH值和溫度下進(jìn)行透析操作。建議使用生化成分盡可能與血清/血漿離子環(huán)境接近的透析緩沖液。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)控制適當(dāng)?shù)木彌_液條件(如37℃、pH7.4)。
建議11：免疫親和提取中的親和柱需要平衡至室溫，再進(jìn)行樣本提取;對(duì)于超過親和柱載量的樣本，需要減少上樣體積進(jìn)行檢測(cè)。
建議12：衍生可以提高待測(cè)物穩(wěn)定性和分析靈敏度，但也有耗時(shí)耗力的劣勢(shì)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇合適的衍生試劑和條件，提高檢測(cè)效率。
建議13：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意前處理過程可能產(chǎn)生的揮發(fā)性氣體、發(fā)熱、噪音等污染，配備良好的通風(fēng)、散熱或者隔音設(shè)備。有條件的實(shí)驗(yàn)室可以設(shè)置獨(dú)立的前處理區(qū)域，與儀器區(qū)分離開，降低對(duì)其它儀器和人員的干擾。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)環(huán)境中影響檢測(cè)結(jié)果的微生物污染、灰塵、電磁干擾、濕度、供電、溫度、聲音和振動(dòng)等進(jìn)行評(píng)估并設(shè)定相應(yīng)要求。
隨著質(zhì)譜技術(shù)在臨床應(yīng)用的不斷深入和前處理技術(shù)的不斷發(fā)展,新型的前處理技術(shù)尤其是自動(dòng)化技術(shù)將逐漸被開發(fā)并應(yīng)用于臨床。生物樣品的分析有望實(shí)現(xiàn)從樣品的采集、處理、分離到分析的完全自動(dòng)化。本共識(shí)通過文獻(xiàn)調(diào)研、用戶調(diào)查、專家咨詢收集的臨床問題，重點(diǎn)對(duì)現(xiàn)有臨床質(zhì)譜前處理技術(shù)的主要原理、選擇依據(jù)和臨床應(yīng)用進(jìn)行了闡述，將適時(shí)修訂，以滿足臨床規(guī)范化應(yīng)用的需求。希望本共識(shí)推動(dòng)解決臨床檢測(cè)樣品前處理規(guī)范化發(fā)展的問題,在保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的前提下實(shí)現(xiàn)臨床檢測(cè)更高效、更經(jīng)濟(jì)、更快捷的前處理過程。
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