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大連化物所利用臺式掃描儀實現(xiàn)高通量單細胞外囊泡分泌分析
2021年10月15日 15:01:22
來源：大連化學(xué)物理研究所 點擊量：6909
近日，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所單細胞分析研究組研究員陸瑤團隊在高通量單細胞外囊泡分泌分析技術(shù)研究中取得新進展，研究利用臺式掃描儀實現(xiàn)了高通量單細胞外囊泡分泌分析。
【化工儀器網(wǎng) 項目成果】近日，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所單細胞分析研究組研究員陸瑤團隊在高通量單細胞外囊泡分泌分析技術(shù)研究中取得新進展，研究利用臺式掃描儀實現(xiàn)了高通量單細胞外囊泡分泌分析。
近年來，單細胞分析技術(shù)迅速發(fā)展并推動了生物醫(yī)學(xué)的研究，然而目前大部分單細胞分析技術(shù)依賴體積龐大、價格昂貴的儀器進行單細胞計數(shù)以及生物分子信號檢測，難以廣泛應(yīng)用。因此，亟需簡便、易于操作、低成本的分析平臺實現(xiàn)單細胞外囊泡分泌物的檢測，以便更好地認識細胞間通訊、信息交換的重要介質(zhì)細胞外囊泡的分泌異質(zhì)性。
為此，該團隊在前期工作(PNAS，2019)基礎(chǔ)上，通過將免疫金銀染色技術(shù)和泊松分布統(tǒng)計相結(jié)合，在臺式掃描儀上實現(xiàn)了無需細胞計數(shù)的高通量單細胞外囊泡分泌分析。該平臺由高通量微孔陣列芯片和抗體涂層玻片組成，微孔陣列芯片用于捕獲單細胞，抗體涂層玻片用于捕獲單細胞分泌的外囊泡。免疫金銀染色是被廣泛采用的染色方法，具有成本低、可靠性強等優(yōu)點。金納米顆?？梢源呋芤褐械你y離子還原，使得金屬銀在膠體金表面產(chǎn)生灰色沉積，便于利用臺式掃描儀可視化檢測結(jié)果。泊松分布是一種離散概率分布，適合于描述單位時間內(nèi)隨機事件的發(fā)生次數(shù)，在微孔陣列芯片中捕獲細胞服從泊松分布的規(guī)律?？蒲腥藛T通過優(yōu)化細胞密度、體積，使得微孔中捕獲的細胞數(shù)目絕大多數(shù)為單細胞；利用該便攜式檢測平臺，分析了人口腔鱗癌細胞系和口腔鱗癌患者原代細胞分泌的不同表型的外囊泡，獲得了與免疫熒光分析類似的結(jié)果。此外，科研人員還利用滴定曲線定量分析每個單細胞分泌外囊泡的數(shù)量，從而可以直接比較不同表型的外囊泡在分泌數(shù)量、分泌率等方面的差異。
相關(guān)研究成果以High-Throughput Single-Cell Extracellular Vesicle Secretion Analysis on a Desktop Scanner without Cell Counting為題，發(fā)表在美國化學(xué)會《分析化學(xué)》(Analytical Chemistry)上。研究工作得到國家自然科學(xué)基金、中科院青年創(chuàng)新促進會、大連化物所創(chuàng)新基金等項目的支持。
利用臺式掃描儀實現(xiàn)了高通量單細胞外囊泡分泌分析
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